乙肝不能根治的原因

　　目前临床上评价干扰素、核苷类似物这些抗乙肝病毒药物时存在一个很大的问题，即其评价指标主要是肝功能的改善与否、血清乙肝病毒DNA水平的变化以及肝组织的病理学改变等。诚然，这些指标对临床医生判断患者病情而言非常重要和实用，也是临床医生选用抗乙肝病毒药物时的依据，然而对于何时停用抗病毒药物、停用抗病毒药物后乙肝病毒是否会重新复制活跃导致乙肝复发则缺乏客观而有效的指标。开展肝细胞内乙肝病毒cccDNA的动态的定量监测可以部分解决这个问题。治疗前后肝细胞内乙肝病毒cccDNA的含量的变化应该纳入到抗乙肝病毒药物评价的指标体系中来，从一定意义上说，只有能够彻底清除乙肝病毒cccDNA的药物，才能算是真正“有效”的抗病毒药物。

　　Schultz等用鸭干扰素－γ(DuIFN-γ)分别在DHBV感染前后作用于原代培养鸭肝细胞，发现100U/ml的DuIFN-γ可使细胞内cccDNA水平下降至1/10～1/20。在DHBV感染前1天加DuIFN-γ，感染后4天细胞内仍然可以检测到cccDNA，但仅相当于不加药对照组感染后1天的水平，说明在DuIFN-γ作用下，新感染病毒的rcDNA仍然可以转化为cccDNA，但子代rcDNA通过细胞内通路扩增形成cccDNA的过程受到抑制。Mason等以拉米夫定治疗WHV感染的土拨鼠，结果发现可使血清病毒的滴度下降至初始水平的0.3%甚至更多，但在维持治疗3～12个月后，95%的土拨鼠肝脏细胞中仍然能检测到病毒，cccDNA水平无明显改变，但有3只土拨鼠感染肝细胞的比率和肝细胞内cccDNA的水平有显著下降（给药组2只，对照组1只），作者认为这可能是免疫清除的结果而非药物的作用。Dandri等以不同剂量(1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)的阿德福韦(adefovir)作用于原代培养的WHV感染土拨鼠肝细胞，发现均可使WHVDNA合成下降90%，病毒颗粒的分泌量下降98%，但对cccDNA的合成没有影响，对包膜蛋白的分泌和RNA的合成无作用。即使在培养基中加入表皮生长因子作用14天以诱导细胞转化（turnover）发生分裂，但细胞内cccDNA水平仍无变化，提示cccDNA可被从母代细胞转运到分裂形成的子代肝细胞中。L-Fd4C(2’,3’-dideoxy-2’,3’-didehydro-beta-L-5-fluorocytidine)是近年来发现和研究较多的核苷类抗病毒药物，其体外抗病毒活性至少较拉米夫定强10倍。Zoulim等用Fd4C作用于原代培养的鸭肝细胞，发现它对逆转录酶的抑制作用强于拉米夫定等其它胞苷类似物，具有持久的抑制病毒复制的作用，但对cccDNA的水平没有影响。当用Fd4C处理病毒感染的鸭和土拨鼠时，对病毒血症和DNA的合成也强于拉米夫定，但是停药后很快复发，因为cccDNA在肝细胞内持续存在。上述结果均说明，尽管核甘类药可以抑制HBVDNA复制，但不能清除cccDNA。